芦丁测定黄酮标准曲线怎么做

芦丁测定黄酮标准曲线是一种常见的实验方法，用于确定黄酮类物质的含量。下面我们来详细介绍一下如何进行芦丁测定黄酮标准曲线的实验。

一、实验材料

1. 芦丁标准品

2. 乙醇

3. 硫酸

4. 苯酚

5. 蒸馏水

6. 乙酸乙酯

7. 磨杯

8. 称量器

9. 洗涤瓶

10. 容量瓶

11. 离心管

12. 恒温槽

二、实验步骤

1. 制备芦丁标准溶液

将芦丁标准品称量0.01g，加入磨杯中，加入1ml的苯酚、1ml的硫酸和20ml的乙醇。用磨杯摇晃混合，待芦丁溶解后，加入蒸馏水补至定容瓶中，摇匀，制备出1mg/ml的芦丁标准溶液。

2. 制备芦丁浓度不同的标准溶液

取1ml的芦丁标准溶液加入到离心管中，加入相应体积的乙酸乙酯，制备出芦丁浓度不同的标准溶液。

3. 测定吸光度

将制备好的芦丁标准溶液和不同浓度的标准溶液分别置于紫外分光光度计中，设置波长为365nm，测定各溶液的吸光度值。

4. 绘制标准曲线

将测定得到的各芦丁标准溶液的吸光度值作为纵坐标，将相应的芦丁浓度作为横坐标，绘制出芦丁测定黄酮标准曲线。

三、实验注意事项

1. 实验过程中应当保证实验器材干净无杂质。

2. 制备标准溶液时，应当按照实验步骤中的比例精确称量药品。

3. 测定吸光度时，应当在紫外分光光度计的波长范围内进行测量。

4. 在绘制标准曲线时，应当按照实验数据的正确性进行绘制。

通过以上步骤，我们可以轻松地制备出芦丁测定黄酮标准曲线，从而确定黄酮类物质的含量。