2-氨基吖啶酮(2-Aminobenzophenone,2-AB)是一种常用的荧光标记剂,它可以用于标记多糖等生物大分子,以便于其在细胞和组织中的检测和分析。本文将详细介绍2-氨基吖啶酮标记多糖的原理、方法及应用。
1. 原理
2-氨基吖啶酮标记多糖的原理是利用2-氨基吖啶酮的荧光特性,将其共价结合到多糖分子上,使得多糖分子具有荧光信号。2-氨基吖啶酮标记多糖的荧光特性主要表现为在紫外光激发下,能够发出蓝色荧光。
2. 方法
2-氨基吖啶酮标记多糖的方法主要包括以下几个步骤:
(1) 多糖的还原
多糖存在着大量的羟基官能团,这些羟基官能团可以被还原剂还原成糖醇。还原后的多糖分子上会出现大量的羟基官能团,这些羟基官能团可以用于接枝2-氨基吖啶酮。
(2) 2-氨基吖啶酮的激活
2-氨基吖啶酮需要通过化学反应激活后才能与多糖分子发生共价结合。激活方法包括:用过氧化氢氧化2-氨基吖啶酮;用硝酸硫酸混合液氧化2-氨基吖啶酮等。
(3) 2-氨基吖啶酮与多糖的共价结合
激活后的2-氨基吖啶酮与还原后的多糖分子在一定条件下反应,形成共价结合的产物。反应条件包括:温度、pH值、反应时间等。
(4) 去除未反应的2-氨基吖啶酮
反应后需要通过透析、洗涤等方式去除未反应的2-氨基吖啶酮和其他杂质,得到纯净的2-氨基吖啶酮标记多糖。
3. 应用
2-氨基吖啶酮标记多糖在生物医学研究中有着广泛的应用。它可以用于糖类分子的定量和分离,也可以用于细胞和组织中多糖的分析和检测。例如,在肿瘤细胞研究中,2-氨基吖啶酮标记的透明质酸可以用于肿瘤细胞的识别和定量。
总之,2-氨基吖啶酮标记多糖是一种简单、灵敏、快速的多糖标记方法,具有广泛的应用前景。